不同光照、pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中生物量、總抗氧化能力的影響（二）
2.2不同光照及pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中DPPH自由基清除能力變化的影響
2.2.1光照不同光照下，血紅密孔菌液體培養(yǎng)過程中DPPH自由基清除能力的變化趨勢大致相同(圖3)。14 d光照培養(yǎng)下，血紅密孔菌對DPPH自由基清除能力從第2天迅速上升至第4天達(dá)到最大值60.73%，到第6天降為40.41%，直到第12天達(dá)到57.54%，第14天下降至50.99%；1 d光照、1 d黑暗交替條件下，DPPH自由基清除能力在第2天達(dá)到最大值71.28%，之后迅速下降，于第6天降至42.77%，接下來的4 d先上升至49.70%(第8天)后下降最低值41.09%(第10天)，最后4 d出現(xiàn)增高，并于第14天達(dá)到64.58%；14 d黑暗培養(yǎng)下，DPPH自由基清除率的變化與1 d光照、1 d黑暗交替培養(yǎng)大致相同，于第4天達(dá)到最大值67.75%，于第6天降至最低值32.22%，第6～14天較平穩(wěn)上升，并于第14天上升至62.23%。上述結(jié)果說明，相較于14 d光照和14 d黑暗條件，14 d光照、黑暗交替條件更利于血紅密孔菌對DPPH自由基的清除，并于第2天達(dá)到峰值，為71.28%。
圖3不同光照條件對血紅密孔菌DPPH自由基清除能力的影響
2.2.2 pH值在血紅密孔菌生長過程中，不同pH值對其DPPH自由基清除率的變化影響較大(圖4)。當(dāng)pH為3時(shí)，DPPH自由基清除率從第2天緩慢上升至第12天，并達(dá)到最大值85.96%，于第14天下降至48.46%；當(dāng)pH為5時(shí)，DPPH自由基清除率先波動(dòng)后下降，總體處于較低水平，最終降至43.75%；當(dāng)pH為7時(shí)，DPPH自由基清除率由第2天的86.83%下降至第4天70.96%，隨后緩慢上升并于第10天達(dá)最大值94.99%，隨后下降，最終降至79.55%；當(dāng)pH為9時(shí)，血紅密孔菌對DPPH自由基的清除率一直處于波動(dòng)狀態(tài)，在第6天達(dá)最大值93.97%，隨后處于下降趨勢，最終于第14天降至69.73%。綜上所述，pH為7時(shí)得到的DPPH自由基清除率峰值與其他3組相比最高，為94.99%，其次是pH 9。可見偏堿(pH 9和pH 7)條件下，血紅密孔菌對DPPH自由基的清除能力較高。
圖4不同pH條件對血紅密孔菌DPPH自由基清除能力的影響
2.3不同光照及pH條件對藥用真菌培養(yǎng)過程中總抗氧化能力(T-AOC)變化的影響
2.3.1光照不同光照條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中總抗氧化能力變化的影響較大(圖5)。14 d光照條件下，血紅密孔菌T-AOC在前10 d的生長過程中緩慢升高，于第2天的4.77 U/mL上升至11.92 U/mL，隨后的第12～14天T-AOC含量波動(dòng)較大，分別在第12天下降至7.34 U/mL，在第14天升高至12.52 U/mL；在1 d光照、1 d黑暗條件下，真菌總抗氧化能力的變化呈“W”型變化，于第2天6.72 U/mL下降至第4天的5.63 U/mL，然后平穩(wěn)提高至第8天13.01 U/mL，接下來的4 d培養(yǎng)過程中，T-AOC下降至9.00 U/mL，最后的2 d T-AOC增強(qiáng)，并于第14天達(dá)到最高值14.18 U/mL；14 d黑暗條件培養(yǎng)下，真菌T-AOC在前10 d呈較緩慢的上升趨勢，由第2天的5.39 U/mL緩慢上升至第10天的13.40 U/mL，隨后在第10～12天的培養(yǎng)過程中，T-AOC迅速上升至25.10 U/mL，到第14天出現(xiàn)較小程度的降低，此時(shí)真菌T-AOC為23.39 U/mL。總體而言，3種光照培養(yǎng)條件下，T-AOC的最大值出現(xiàn)在14 d黑暗培養(yǎng)的第12天，為25.10 U/mL，較其他兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，黑暗條件下有助于增強(qiáng)血紅密孔菌的總抗氧化能力。
圖5不同光照條件對血紅密孔菌總抗氧化能力的影響
2.3.2 pH值不同pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中總抗氧化能力變化的影響較大(圖6)。當(dāng)pH為3和5時(shí)，血紅密孔菌總抗氧化能力變化趨勢基本一致，始終維持在較低水平(10 U/mL以下)；當(dāng)pH為7時(shí)，總抗氧化能力從第4天開始迅速增加至第10天，并達(dá)最大值64.34 U/mL，隨后逐步下降，在第14天降至47.69 U/mL；當(dāng)pH為9時(shí)，總抗氧化能力從第6天快速上升，并于第8天上升至最大值62.49 U/mL，隨后快速下降至25.9 U/mL(第12天)，然后維持基本不變。綜上所述，偏酸環(huán)境對血紅密孔菌抗氧化能力基本沒有影響，而中性及偏堿環(huán)境對其影響較大，且對比偏酸環(huán)境差異顯著。因此，中性及偏堿性環(huán)境更能提高血紅密孔菌的總抗氧化能力。
圖6不同pH條件對血紅密孔菌總抗氧化能力的影響
3討論
在不同的培養(yǎng)條件下，光照和pH值是真菌發(fā)酵過程中最重要的環(huán)境因素，對細(xì)胞的生長、產(chǎn)物的合成都有重要影響，進(jìn)而影響其產(chǎn)量和抗氧化活性。本研究通過測定血紅密孔菌培養(yǎng)過程中的生物量、DPPH自由基清除能力、T-AOC，探索了光照和pH對血紅密孔菌生長及抗氧化活性的影響，為進(jìn)一步研究和利用血紅密孔菌提供參考。
研究表明，不同光照和pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中生物量、DPPH自由基清除率、T-AOC和多糖含量都有差異，但其影響程度不同。總體而言，黑暗環(huán)境更利于血紅密孔菌的生長以及抗氧化活性的增強(qiáng)，且二者的增長趨勢比較一致。相對于14 d光照和1 d光照、1 d黑暗交替的光照條件，血紅密孔菌在14 d黑暗環(huán)境中有最大生物量，為4.49 g/L，是其他光照條件的1.5倍，同時(shí)中間生長過程伴隨有基質(zhì)的大量消耗；T-AOC于第12天達(dá)到最高值25.10 U/mL。不同pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中各項(xiàng)指標(biāo)影響有一定差異。偏酸環(huán)境更適于血紅密孔菌的生長，但中性和偏堿環(huán)境抗氧化能力較高。當(dāng)pH為5時(shí)血紅密孔菌在培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的生物量在第10天達(dá)到最大值，為1.69 g/L。而DPPH自由基清除能力和T-AOC的最高值均出現(xiàn)在pH 7時(shí)，于第10天分別達(dá)到94.99%和64.34 U/mL。本研究初步分析了光照和pH值對血紅密孔菌的生長與抗氧化能力的影響，為相關(guān)研究的細(xì)致分析，以及為分離分析該菌的抗氧化生理活性物質(zhì)等相關(guān)工作提供參考，以促進(jìn)開發(fā)和利用該菌的藥用價(jià)值。
不同光照、pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中生物量、總抗氧化能力的影響（一）
不同光照、pH條件對血紅密孔菌培養(yǎng)過程中生物量、總抗氧化能力的影響（二）
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