蠟樣芽孢桿菌的生長環境、形態特征、培養特性、實驗室診斷等知識匯總
蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）普遍存在于自然界，從土壤、食物到人體腸道，該菌不僅引發了各種食源性疾病，還在特定條件下造成眼部感染和其他感染。本文將深入剖析蠟樣芽孢桿菌的生長環境、形態特征、基因結構、培養特性，旨在全面認識這一重要病原體。
圖1、Bacillus cereus（蠟樣芽孢桿菌）
生長環境：
蠟樣芽孢桿菌廣泛分布于土壤、蔬菜、牛奶、谷物、香料、炒飯、熟禽肉和肉類、湯品、甜點等多種環境中。
1887年，Frankland首次從牛棚空氣中分離出該菌。
作為一種腐生型芽孢桿菌，其營養體細胞和芽孢在自然界中廣泛存在。
蠟樣芽孢桿菌對免疫功能低下患者來說是機會致病菌，有時也會成為人類病原菌，但它并非人體正常菌群，只是可能暫時定植于皮膚、消化道或呼吸道。
其芽孢對抗物理及化學因素（如高溫、低溫、干燥、輻射、消毒劑、抗生素和其他毒素）的能力極強，能夠在有氧和無氧條件下生長。
蠟樣芽孢桿菌在植物根系周圍的根圈中與其他微生物相互作用，并存在于無脊椎動物腸道微生態中，特別是作為節肢動物的腸道共生菌，在蠼螋、蟑螂和白蟻體內表現出絲狀生長。
此外，蠟樣芽孢桿菌不易被酒精殺死，它們甚至能在酒精制品中繁殖，足以引起感染。
在患者糞便樣本中檢出蠟樣芽孢桿菌并不能作為確診依據，因為正常糞便樣本中也可能存在該菌，只有當食品樣本中每克含有10^5個或以上細菌時，才被視為診斷標準。
形態及基因組：
革蘭氏陽性桿菌，呈桿狀兩端平直，隨著菌體老化可能出現革蘭染色變異。
單個菌體也可短鏈排列，鏈內各菌體之間界限清晰可見。
在組織切片染色中，可能呈現長而絲狀的形態。
菌體直或稍有彎曲，不形成莢膜。
芽孢呈橢圓形，不會使母細胞膨脹，在動物血液和組織中或好氧培養條件下不形成芽孢。
呈現周生鞭毛運動，具有游動性和滑行兩種運動方式。
芽孢是一種β溶血細菌，能夠在惡劣環境下存活，可引發食源性疾病，其毒力因子包括cerolysin和磷脂酶。
在基因組結構方面，擁有一個長度為5,411,809nt的環狀染色體，其中包括5481個基因，編碼5234種蛋白質，147個結構RNA，以及5366個RNA操縱子。此外，它還攜帶有大小為5至500kb的質粒。
圖2、形態特性
培養特性：
蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）在營養瓊脂或蛋白胨培養基上易于生長。最佳生長溫度20°C-40°C，屬中溫菌種，具有較強的環境適應能力。在37°C的營養瓊脂上，蠟樣芽孢桿菌形成大的（2-5毫米）灰白色、顆粒狀菌落，邊緣較平直，質地較不膜狀。在37°C的5%羊血瓊脂上，其菌落表現為大型、羽狀、暗灰色、顆粒狀、擴展性強的菌落，表面粗糙且有棉絮感，邊緣不規則，這種不規則邊緣可能與其滑行運動有關。在血瓊脂上，蠟樣芽孢桿菌顯示為β溶血性。
圖3、培養特性
有些情況下，菌落會單獨形成光滑型或在粗糙型菌落中出現。當遠離初始接種點獨立生長時，光滑型菌落周圍會出現一圈均勻β溶血環。MYP瓊脂常用于蠟樣芽孢桿菌的平板培養，但由于其選擇性較差，背景菌群不受抑制，可能導致蠟樣芽孢桿菌被掩蓋。蠟樣芽孢桿菌在MYP瓊脂上通常為卵磷脂酶陽性、甘露醇陰性。
Bacara是一種選擇性和鑒別性色素培養基，有利于蠟樣芽孢桿菌的生長和鑒定，同時抑制背景菌群的生長。蠟樣芽孢桿菌在此培養基上會形成粉紅色至橙色、伴有不透明暈圈的菌落。建議采用這種色素培養基來替代MYP瓊脂對蠟樣芽孢桿菌群體進行計數，典型的菌落將以粉紅色至橙色的均勻菌落形式出現，周圍有一圈沉淀區。
實驗室診斷
直接檢測：通過革蘭氏染色，微生物顯微鏡下可見單一、成對或蛇形排列的大號革蘭氏陽性桿菌，兩端平齊，可見中心位置的未染色橢圓形或圓形區域，即為芽孢。芽孢呈橢圓形，且不使母細胞腫脹。
培養鑒定：5%羊血瓊脂、巧克力瓊脂、常規血液培養基和營養肉湯，35℃環境下，通常24小時內可見菌落生長。菌落特征大型羽毛狀、擴展性強、暗灰顆粒狀、蔓延快、表面粗糙且呈棉絮狀，邊緣不規則，且為β溶血性。分離可采用選擇性培養基，如MYPA（甘露醇、卵黃、多粘菌素、酚紅、瓊脂）或PEMBA（多粘菌素、卵黃、甘露醇、溴甲藍瓊脂）。利用蠟樣芽孢桿菌在卵黃瓊脂上磷脂酶C陽性的特性、不發酵甘露醇，以及添加吡哆醇或多粘菌素作為選擇性試劑。
生化分析：
過氧化氫酶試驗：陽性
氧化酶試驗：陰性
OF試驗：發酵型
吲哚試驗：陰性
甲基紅試驗：陽性
Vogues-Proskauer試驗：陽性
葡萄糖發酵：發酵產酸
蔗糖發酵：發酵產酸
乳糖發酵：不發酵
淀粉水解：陽性
硝酸鹽還原：陽性
明膠水解：陽性
芽孢染色：形成芽孢的細菌
運動性：可運動
蠟樣芽孢桿菌是一種環境適應性強的革蘭氏陽性桿菌，其耐熱芽孢可引發嘔吐型和腹瀉型食物中毒。除食物中毒外，還能導致眼部感染和其他系統性感染。預防蠟樣芽孢桿菌感染的關鍵在于嚴格遵守食品安全規定，妥善處理和儲存食物，以及加強醫療操作衛生，特別是對易感人群的保護。
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